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  • 产品名称:intronbio 25021

  • 产品型号:25021
  • 产品厂商:intronbio
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简单介绍:
intronbio 25021 高纯度i-Taq™PCR核心试剂盒,无论模板类型和反应条件如何,均可显示稳定,高效的DNA扩增 intronbio 25021特点: •94 KDa热稳定DNA聚合酶 •高纯度Taq DNA聚合酶 - 去除大肠杆菌衍生的蛋白质和DNA,可作为PCR来源 •适用于从克隆DNA到人类基因组DNA的DNA •缓冲液优化,以显示*良聚合酶活性,无论模板类型或反应条件如何
详情介绍:

intronbio 25021说明书

i-Taq™ DNA Polymerase

i-Taq™DNA聚合酶

 

 

Cat.No

Capacity

25021

250 unit

25022

500 unit

 

产品信息

描述

高纯度i-Taq™PCR核心试剂盒,无论模板类型和反应条件如何,均可显示稳定,高效的DNA扩增

  • •94 KDa热稳定DNA聚合酶
  • •高纯度Taq DNA聚合酶
       - 去除大肠杆菌衍生的蛋白质和DNA,可作为PCR来源
  • •适用于从克隆DNA到人类基因组DNA的DNA
  • •缓冲液优化,以显示*良聚合酶活性,无论模板类型或反应条件如何

i-Taq™DNA聚合酶是一种94kDa的热稳定DNA聚合酶,通过克隆Thermus aquaticus(菌株YT1)的聚合酶基因在大肠杆菌中表达。它去除了大肠杆菌来源的蛋白质和DNA,它可以作为PCR中的污染物,是稳定有效的DNA扩增产物。基因组DNA,cDNA等可以扩增至5Kb。PCR(聚合酶链反应)是通过特异性重复特定DNA位点的合成来扩增试管中所需DNA分子的方法。结果,可以使用非常少量的DNA合成大量的DNA。当然,它广泛用于基础生物学,医学和生物学领域。我们现在正在简单快捷地扩大其在法医,食品,环境卫生和动植物检验领域的使用范围。58体外-10 倍。扩增的DNA可用于如下的各种实验。根据实验结果,可以应用各种医学研究。在开发该方法的早期,使用大肠杆菌DNA聚合物进行PCR,因此必须在每次变性时补充变性大肠杆菌的DNA聚合酶。然而,通过在PCR中使用从Thermus aquaticus分离的热稳定DNA聚合酶,我们不必每一步都做补充酶的麻烦任务。结果,PCR成为分子生物学不可或缺的方法。PCR具有一系列三个步骤并重复30至40次。

PCR的**步是DNA的变性,通过加热分离两条DNA链。每个分离的DNA用作模板,变性温度取决于DNA中G + C的量和长度。PCR的第二步是退火。在此阶段,引物与模板DNA结合,退火温度是决定反应准确性的重要因素。如果温度太高,引物将与模板DNA结合得太弱。如果温度太低,可以扩增不需要的DNA,因为引物非特异性结合。PCR的第三步是延伸步骤。在这个阶段,耐热DNA聚合酶将从模板DNA产生新的DNA。i-Taq™DNA聚合酶除高纯度酶外,通过优化缓冲液组合物以显示*良聚合酶活性,无论模板类型或模板的一半,都可以获得高度可重复的结果。由于用该酶扩增的大多数产物在3端具有碱基A,因此可以将PCR产物原样克隆到T载体中。它也可以通过用DNA聚合酶如Klenow DNA聚合酶或T4 DNA聚合酶填充它而将其磷酸化成平末端而克隆到平端载体中。

 

应用

  • 01基因组DNA,cDNA扩增至5kb
  • 02T / A克隆或平端克隆

 

套件内容

 

内容 250个单位 500个单位
i-Taq™DNA聚合酶(5U / ml) 250单位×1管 500单位×1管
10×PCR缓冲液(含20 mM MgCl2 1毫升×1管 1毫升×1管
10×MgCl 2游离PCR缓冲液 1毫升×1管 1毫升×1管
10 mM dNTPs(2.5 mM /每个) 500μl×1管 1毫升×1管
25mM MgCl 22 1毫升×1管 1毫升×1管
手册 1 ea 1 ea

技术数据

灵敏度比较数据(与其他公司比较)

i-Taq TM DNA聚合酶与公司A,B相同功能的DNA聚合酶的灵敏度比较。在该实验中,通过浓缩稀释牛gDNA并用CSF引物扩增。

泳道M,100bp DNA标记; 泳道1,1ng gDNA; 泳道2,100pg gDNA; 泳道3,10pg gDNA; 泳道4,1 gg gDNA; 泳道5,100fg gDNA; 泳道N,阴性对照

批次稳定性数据

确认了每批i-Taq TM DNA聚合酶的灵敏度活性。从连续稀释的SNU-1 cDNA和λDNA中扩增GAPDH(575bp)和1Kb片段以确认灵敏度。使用1单位的i-Taq TM DNA聚合酶扩增总共20ml反应混合物,并通过琼脂糖凝胶电泳分析5ml。

泳道M,100bp DNA标记; 1 Kb DNA标记; 泳道N,阴性对照

沪公网安备 31011502007949号